啤酒中的鐵
鐵可能會對風味、湧出(不受控制的過度發泡)和穩定性產出負面影響。
因此，啤酒中鐵濃度的參考值<0.200mg/L [1]。
本應用報告介紹了根據MEBAK方法[2]測定啤酒中的鐵(Fe2+)。此方法是基於測量560nm處的吸光度。
Fe2+與5,6-二苯基-3-(2-吡啶基)形成亮紫色錯合物
1,2,4-三嗪-4,4-二黃酸-也稱為鐵嗪。由於鐵主要以Fe3+形式存在，
因此首先需要使用以下方法將其還原為Fe2+抗壞血酸。
對濃度測定為基於校準曲線。
圖1:鐵鋅
材料和方法
樣品和試劑
啤酒樣品 抗壞血酸
醋酸銨 鐵標準溶液 1000mg/L
冰醋酸100%
鐵鋅/鐵光譜
儀器及配件
UV5分光光度儀
XPR205分析天平
定量瓶
Rainin pipette 和 tips L-20mL
樣品: pipette L-16000XLS
1mL鐵嗪試劑，0.5mL
試劑準備
-緩衝液pH4.3
將約80mL d.d.H2O 倒入100mL
將容量瓶中加入7.5g乙酸銨和5g乙酸，用d.d.H2O溶解並稀釋至刻度。
-鐵鋅試劑
稱取0.257g鐵嗪於50mL燒瓶中，以緩衝液溶解稀釋至刻度。
-2.5% W/V 抗壞血酸
稱取0.5g抗壞血酸於20mL容量瓶中，以d.d.H2O溶解並稀釋至刻度。
該溶液需要每天現配。
-鐵標準溶液(5 µg /mL)
移取0.1mL標準溶液(1000mg/l)於20mL量瓶中，並以d.d.H2O定量。
-啤酒
透過搖晃和過濾來去除二氧化碳。
測量
標準品/樣品/空白的製備
對於每個標準品/樣品，分別準備一個25mL容量瓶，如下所示:
標準移取1mL鐵嗪試劑，0.5mL抗壞血酸溶液和20mL每個燒杯裡都有啤酒，
根據表中添加鐵標準，用d.d.H2O加滿至燒杯刻度線。
加入Fe2+ (µg) 鐵標準品(mL)
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0.5 |
0.1 |
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1 |
0.2 |
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2 |
0.4 |
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4 |
0.8 |
空白:
將0.5mL抗壞血酸溶液和20mL啤酒移入燒瓶中。用d.d.H2O填滿至燒杯刻度。
測量參數
Qb1=波長1的校準曲線的斜率
V=樣品體積(mL)
計算:由於啤酒樣品中添加標準品的Fe2+，正常定量會導致鐵濃度被低估，
因此，一個採用特殊計算。使用上述計算確定三個樣品的Fe2+濃度。
結果
四種Fe2++標準品的校正曲線-添加量範圍為0.5至4µg (圖2)
圖2: Fe2+的校準曲線
計算並報告標準差(SD)以及相對標準差(Srel)結果如下表所示。
3種不同的啤酒樣品顯示不同程度的再現性，導致Srel範圍為0.75%至5.70%。
參考文獻
[1] Analytica-EBC, Grundwerk 1998, Chapter 9.13.2.
[2] MEBAK Würze, Bier, Biermischgetränke; Methodensammlung der Mitteleuropäischen Brautechnischen Analysenkommission; Hrsg. Jacob, F.; chapter 2.24.6.2.